肿瘤无处逃!临床前研究表明三特异性duoCAR-T细胞可有效治疗抗原异质性癌症

在一项新的研究中，研究人员让表达靶向CD19和CD20的串联CAR的慢病毒载体转导原代CD4+ T细胞和CD8+ T细胞，所表达的串联CAR通过P2A自切割肽与靶向CD22抗原的monoCAR操作性连接在一起，据此开发出三特异性duoCAR-T 细胞，并评估了这种三特异性duoCAR-T 细胞解决抗原逃逸问题的能力。

研究人员构建出4种duoCAR构建体，每个构建体的两个开放阅读框都被一个P2A肽隔开，它们在T细胞表面上的表达谱如图1所示。DuoCAR D1由靶向B细胞抗原CD19和CD20的串联单链可变区片段结合结构域、来源于CD8的铰链和跨膜结构域、ICOS共刺激结构域、CD3激活结构域以及位于CD3激活结构域之后的第一代靶向CD22的CAR基因、来源于CD8的铰链和跨膜结构域、CD3激活结构域组成。D2与D1相同，只是用OX40结构域代替了ICOS共刺激结构域。D3含有与构建体D2相同的靶向CD19和CD20的串联CAR基因，该串联CAR基因后面是一个靶向CD22的 CAR基因、第二代ICOS共刺激结构域和CD3激活结构域。D4含有靶向CD20和CD19的串联CAR基因和CD27共刺激结构域，还含有靶向CD22的CAR基和ICOS共刺激结构域，此外每个共刺激结构域后面是一个CD3激活结构域。

这项研究在体外和体内证实了duoCAR-T细胞的高功能性。这种方法广泛解决了抗原异质性的紧迫问题。这些作者发现了一个未预料到的不包括CD28或4-1BB结构域的最佳共刺激结构域的组合，这表明科学家们对与高活性和长期持久性相关的T细胞信号转导的理解仍在继续完善。在CAR-T方法被认为得到真正优化之前，必须考虑到激活、长期持续性以及对通常由细胞因子介导的生理信号作出的反应。从p38和Erk1/2磷酸化来看，duoCAR中一些激活信号的减少表明，最大的初始激活可能与疾病控制不相关。这项研究开发的duoCAR-T细胞方法在当前CAR-T细胞疗法的基础上进行了改进，克服了肿瘤异质性和肿瘤抗原逃逸的临床挑战，同时保较高的抗肿瘤效力和持久性。